Análise proteómica: extractos vegetais com actividade neuroprotectora
INÍCIO: Setembro de 2011
INTRODUÇÃO: A neurodegeneração é um processo multifactorial, que inclui um conjunto complexo de reacções oxidativas que levam à morte neuronal. Presentemente, em vez de um único fármaco, estas doenças requerem um cocktail de fármacos com propriedades plurifarmacológicas como terapia. Não obstante, esta estratégia não é suficiente para impedir ou atrasar a neurodegeneração. Urge então encontrar novas estratégias terapêuticas que possam ajudar na prevenção e/ou atraso da neurodegeneração. As plantas, que constituem um enorme reservatório natural de milhares de metabolitos secundários, são particularmente ricas em polifenóis, que têm vindo a ser referidos como potenciais neuroprotectores. Portanto, o estudo destes compostos naturais, em modelos celulares de neurodegeneração, poderá contribuir para a identificação de potenciais substâncias bioactivas e dos mecanismos moleculares pelos quais a nossa dieta pode exercer um efeito potencialmente protector contra as doenças neurodegenerativas.
O presente plano de trabalho insere-se num projecto que visa estudar e caracterizar os mecanismos celulares e bioquímicos subjacentes ao modo de acção de alguns dos extractos vegetais, seleccionados como tendo potencial actividade neuroprotectora. Diversos parâmetros tais como a viabilidade celular e apoptose, a produção de ROS, os teores de tióis totais, a medição da hidroperoxidação lipídica, a maquinaria endógena celular antioxidante bem como as alterações redox das proteínas, estão a ser avaliados num modelo de neurodegeneração, aquando da pré-incubação das células com extractos vegetais.
O objectivo deste trabalho enquadra-se na avaliação das alterações que os extractos vegetais exercem no metabolismo proteico do modelo celular de neurodegeneração em estudo.
PLANO DE TRABALHO: O material biológico usado neste estudo é a linha celular SK-N-MC proveniente de um neuroblastoma humano e o modelo de neurodegeneração usado resulta da imposição de stresse oxidativo a esta mesma linha celular.
O trabalho proposto é realizado no âmbito do projecto intitulado EUBerry, com referência FP7-KBBE-2010-4-265942 e envolverá as seguintes fases:
FASE 1 – Avaliação das alterações do perfil proteico das células sujeitas a stress oxidativo (modelo de neurodegeneração), usando electroforese bidimensional;
FASE 2 – Avaliação das alterações do perfil proteico das células resultante da pré-incubação com extractos vegetais e posterior indução de stress oxidativo, usando electroforese bidimensional;
FASE 3 – Análise detalhada dos perfis proteicos obtidos, usando um software adequado à análise de imagens de géis bidimensionais, para obtenção dos polipétidos que respondem diferencialmente às condições impostas às células;
FASE 4 – Integração dos resultados obtidos.
COLABORAÇÕES PREVISTAS: A realização deste trabalho prevê colaborações, já em curso, com o grupo de Proteomic Research Laboratory (Prof. David Sheehan) da University College Cork, Irlanda e com o grupo da Proteomics Core Facility (Dr. Paul Jenoe) do Biozentrum, University of Basel, Suiça.
ORIENTADORES: Cláudia Nunes dos Santos (csantos@itqb.unl.pt, 21 446 96 51) e Marta Alves (malves@itqb.unl.pt, 21 446 96 53)
